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液相色譜儀使用時必須注意的四大關鍵因素

更新時間:2018-06-27      點擊次數:2048

液相色譜儀作為分析實驗室*儀器之一,是實驗室分析員應用頻率較高的儀器,縱然是經常使用的經驗豐富的老司機在使用過程里不可避免的還是往往疏忽一些問題,從而導致一些儀器的故障。方便快速的分析過程固然重要,但是為了多種樣品而忽略了一些細節步驟,總是會犯些錯。本文盤點在使用液相色譜儀時四大關鍵因素,對正確使用極為重要。

1.液相色譜儀本身:

對于儀器本身一般不會有問題,特別是剛買回來的新儀器。對于儀器本身重要的就是儀器的校驗,剛買回來的儀器一般都是由賣家先對儀器做系統的確認工作(包括IQ、PQ、OQ),確認順利通過后,再請國家或省級儀器檢定局的來校驗,檢定合格后就可以放心使用了,除此之外,一些做得好的公司每半年會對儀器進行一次的內部校驗,目的就是為了保證儀器的正常可運行狀態。

2.色譜條件:

色譜條件一般包括流動相、色譜柱、檢測波長、流速及進樣量。

流動相就涉及到配制流動相所用到的水和試劑試液,水一般要求用超純水或其他水的電阻率不大于18.2兆歐級別,試劑試液要求用色譜級別的,原因為防止水和試劑試液中的雜質對色譜結果的干擾。

色譜柱會因不同的品種而有不同的要求,但每根色譜柱都有它的清洗要求,這個在色譜柱說明書上都可以找到,一定要根據上面的要求進行,否則會造成色譜柱效下降和色譜柱的使用壽命縮短,檢測波長也會因品種的不同有不同的要求,這里需要指出的是要注意觀察檢測器氘燈能量的變化,比如基線波動大,活性成分的響應值突然變小等,都有可能是氘燈的能量不足所引起的,氘燈一般建議使用800小時,但實際上使用時間不止,可根據實際情況更換。

流速也因品種的不同而不同,一般為1.0ml/min,流速是不可隨意改動的,特別是作為QC人員,但是作為研發人員,有時為了摸索條件或進行方法耐用性驗證,會對流速進行改變以評價方法的適用性。對于進樣量因不同的品種也有不同規定,如果使用六通閥自動進樣,一般進樣精密度都很好,不需強調什么。

3.操作人員:

首先,作為液相色譜儀操作人員,一定要認真學習液相的說明書,掌握液相硬件和軟件的操作,掌握日常的維護保養,掌握基礎故障的排除和維修。

一般液相色譜儀的操作規程也是有操作人員起草的,所以只要嚴格按照操作要求進行操作,一般不會出現問題,當然這里需要特別指出的是對于液相的日常維護保養很重要,比如流動相的過濾、脫氣、泵密封墊的清洗、系統管路的清洗、溶劑過濾頭的清洗等,倘若不堅持,很容易導致色譜柱堵塞、系統壓力過強、色譜峰異常等不必要的故障,浪費時間。

其次,操作人員在配制液相色譜儀分析用待測樣品溶液時,由同一個人單獨完成,以免不必要的偶然誤差從而造成分析的失敗或誤差。

4.液相安裝環境:

液相色譜儀應盡量安裝于水平、遠離振動、電磁干擾的屋內的臺面上,有條件的話盡量將液相數據處理系統分隔開,一個是防止色譜基線噪音偏大,基線不穩等,一個是為減少對人體的危害。

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